Фрагментация днк сперматозоидов: что это такое, методы исследования

Фрагментация ДНК сперматозоидов – это показатель, который начали исследовать относительно недавно. Однако такое исследование стало настоящей революцией в сфере определения причин мужского бесплодия.

Анализ помогает определить полноценность генетического материала в сперматозоидах, требует специальных реагентов, а также хорошего технического оснащения лаборатории, поэтому стоимость такого исследования довольно высока.

В данной статье мы обсудим суть проводимого анализа, его цену, условия сбора материала, возможную расшифровку получаемых результатов.

Отличие от спермограммы

Многие люди привыкли полагать, что наличие или отсутствие бесплодия определяет спермограмма. На деле же показатели, ею отображаемые, сильно отличаются от анализов на фрагментацию.

В спермограмме отражается качественный и количественный состав эякулята, его объем, физические характеристики.

В тестах на ДНК определяется количество сперматозоидов, которые несут качественный генетический материал, а значит, количество половых клеток, способных образовать полноценную зиготу с яйцеклеткой.

В некоторых источниках данные исследования подаются как «фрагментация ДНК спермограммы». Такое название считается ошибочным, поскольку никакой взаимосвязи анализ на ДНК со спермограммой не имеет. Даже сбор материала осуществляется для каждого исследования по отдельности.

Назначение исследования

Фрагментация ДНК сперматозоида – это процесс разрыва цепочек ДНК, которые содержатся внутри его головки, выполняя основную роль половой клетки – передачу генетического материала. Данный процесс считается патологическим, поскольку влияет на возможность зачатия, нормального развития эмбриона, успешность вынашивания ребенка.

Оплодотворение яйцеклетки фрагментированным сперматозоидом фактически не дает нормальной зиготы, а если зачатие случилось, то начинаются проблемы с присоединением плаценты, развитием эмбриона. Как следствие, часто случаются выкидыши.

При этом содержание сперматозоидов в эякуляте не нарушается, иные показатели спермограммы также остаются нормальными. Единственное отклонение общего анализа спермы, которое иногда замечается при фрагментированности клеток, – это показатели нормальной морфологии клеток.

Кому показано

Тест на фрагментацию сдается при невозможности объективно установить причину отсутствия у пары детей с помощью обычных анализов. Поводом для исследования также могут стать:

• Беспричинное бесплодие.
• Многократные выкидыши.
• Возраст мужчины после 45 лет.
• Варикоцеле.
• Подготовка к процедуре ЭКО или ИКСИ.
• Плохие показатели морфологии клеток, отражаемые спермограммой.

Исследование нужно провоодить при варикоцеле.

Разновидности тестов

Сдать анализ на фрагментацию ДНК сперматозоидов можно в частных поликлиниках, лабораториях, а также в центрах планирования семьи. Учитывая то, что для проведения теста используются различные методы, пациентам приходится выбирать, но на результат выбора чаще влияет не суть или эффективность методики, а цена проводимого исследования.

Halosperm тест являет собой исследование хроматина сперматозоидов. Этим тестом отображается не уже имеющиеся нарушения структуры ДНК, а склонность цепочек к денатурализации, поэтому прогнозирующую способность данного теста нельзя назвать достаточно высокой. Цена его составляет около 4500-5000 рублей.

TUNEL-тест – инновационная методика тестирования спермиев на фрагментацию ДНК.

Путем смешивания специального энзима с исследуемым материалом и последующим его рассмотрением под микроскопом удается проанализировать соотношение фрагментированных клеток относительно здоровых.

Результаты TUNEL-теста имеют высокую прогнозирующую способность. Сама методика считается максимально точной для таких исследований. Цена анализа составляет приблизительно 10000 рублей, хотя некоторые лаборатории предлагают сниженную цену – 7500-8000 рублей.

Как собрать материал?

Готовиться к исследованию на фрагментацию половых клеток мужчине нужно так же, как и к проведению спермограммы, а именно:

1. Три дня соблюдать половой покой.
2. Отказаться от бани, горячего душа, тесного белья.
3. Исключить употребление алкоголя, никотина, лекарственных средств.

Где собирать материал, решает сам пациент, но отдать свое предпочтение лучше именно лабораторным условиям, для сохранения чистоты материала, а также его целостности, ведь когда на улице температура -30°С, то избежать замораживания контейнера чрезвычайно тяжело. Воздействие высокими или низкими температурами может стать причиной получения недостоверных данных.

Перед сдачей анализов следует отказаться от бани и горячего душа.

Инструкция сбора спермы для анализа фрагментации и спермограммы одинакова: необходимо добиться эякуляции вручную, поместить семенную жидкость внутрь стерильного пластикового контейнера, не касаясь его внутренних стенок, и сдать на исследование на протяжении часа после сбора.

Сдав анализ единожды, необходимо быть готовым к повторной его сдаче, ведь показатели по истечении некоторого отрезка времени могут отличаться из-за устранения причины фрагментации или изменений условий жизни. Чаще всего повторно сдают анализ мужчины после 30 лет, имеющие вредные привычки.

Как читать результаты

Результаты анализов пациент получает на руки, поэтому имеет возможность рассмотреть показатели самостоятельно. Уровень фрагментации ДНК сперматозоидов отображается в процентах, а расшифровывается следующим образом:

• До 15% – возможно естественное оплодотворение.
• 15-25% – естественное оплодотворение затруднено.
• Фрагментация превысила 30% – показание для ЭКО.
• Количество спермиев с разрывами ДНК превысило 50% – показание для ИКСИ.
• Фрагментация больше 60% – показание для использования донорского материала.

Фрагментация у здоровых мужчин обычно не превышает 15%. Даже если фрагментированный спермий попадает в яйцеклетку, она может самостоятельно восстановить поврежденную структуру его ДНК.

Наилучшая способность к этому сохраняется у молодых будущих матерей.

Стоит отметить, что при фрагментированных ДНК в сперматозоидах до 30% естественное оплодотворение считается возможным, но оно может занять достаточно длительное время, поэтому паре лучше запастись терпением.

Если показатель будет превышать этот порог, то лучше прибегнуть к методам искусственного оплодотворения. Методика ИКСИ позволяет выбрать сперматозоид для оплодотворения с нормальной структурой ДНК, что уменьшает риски выкидышей или аномалий развития эмбрионов.

Как видно из изложенного выше материала, спермограммы не всегда достаточно для точного определения причины бесплодия пары. Благодаря развитию науки нынче можно заранее определить возможность мужчины нормально зачать ребенка, а также предпринять необходимые меры в случае нарушения или утери такой возможности.

Источник: https://egopik.ru/fertilitatem/diagnosis/dnk-fragmentaciya-spermatozoidov

Фрагментация ДНК сперматозоидов — сдать анализ

HALO-тест это актуальный метод оценки целостности ДНК. Поэтому сначала мы рассмотрим его. В отличие от других методов, HALO выявляет и “подсвечивает” не поврежденную, а целую ДНК. Вокруг “здоровых” сперматозоидов с неповрежденной ДНК формируется ореол, который отчетливо виден на оптическом микроскопе.  Таких ореолов нет у мужчин с поврежденной ДНК.

Анализ выполняют спустя 30-60 минут после разжижения эякулята. Оценивают от 200 до 500 сперматозоидов с хвостами (незрелые не оценивают).

Здоровые сперматозоиды подсвечиваются большим и четким ореолом

У сперматозоидов с неповрежденной ДНК-молекулой есть четкий большой ореол. У сперматозоидов с фрагментацией (разрывами) ДНК такого ореола нет или он не четкий.

В основе теста HALO лежит метод SCD (запатентован компанией Halotech) . На сегодняшний момент этот метод активно используется в клинической практике и участвует во множестве клинических испытаний. HALO считается более чувствительным тестом, по сравнению с остальными.

• Референсное значение (норма)  для этого теста – 20% и ниже.
• Это значит, что сперматозоидов с фрагментацией ДНК должно быть меньше 20% от общего количества.
• А если больше 20%? Читайте про расшифровку

Лаборант смешивает сперму со специальным реактивом, запуская тем самым процесс денатурации ДНК, а затем окрашивания. Если ДНК спермы не повреждена (не фрагментирована), вокруг плотного центрального ядра ДНК образуется четкий «ореол».

Если ДНК спермы имеет разрывы, то ореола нет, даже если он проявляется, то очень тонкий и неясный. Это хорошо видно под микроскопом, когда сперматолог-эмбриолог считает сперматозоиды с фрагментированной ДНК.

Результат подсчета выражается в процентах, и в норме он не должен быть более 20%.

Для полноты обследования параллельно с анализом фрагментации ДНК обычно выполняют спермограмму и ЭМИС (электронно-микроскопическое исследование спермы). Если они были сделаны ранее, но не более 3 месяцев назад, покажите их врачу на консультации. Все 3 анализа можно провести из одной порции спермы.

1. Подготовка подразумевает воздержание в течение 2–5 дней.
2. Метод сбора эякулята — мастурбация.
3. Ёмкость для сбора эякулята — стерильный контейнер (бесплатно у администратора лаборатории)
4. Непосредственно перед сбором материала нужно освободить от содержимого мочевой пузырь и помыть половые органы

Если тест проводится неоднократно, продолжительность воздержания должна быть всегда одинаковой. Это важно для сравнения результатов в динамике.

Если образец собирается дома, то доставить контейнер в лабораторию должен курьер в контейнере, поддерживающим температуру.

У каждого теста свои нормы (референсные значения). После проведения исследования формируется протокол, где указан индекс фрагментации ДНК.

Что показывает индекс фрагментации? Он отражает процентное соотношение между «здоровыми» сперматозоидами и сперматозоидами с разрывами в ДНК-цепочках.

Рассмотрим расшифровку на примере норм для HALO-теста.

Результат анализа считается нормальным, если индекс фрагментации не превышает 20%. Это означает, что количество половых клеток с поврежденной ДНК составляет не более 20% от общей их численности. Существует высокая вероятность наступления здоровой беременности естественным путем.

Если индекс фрагментации повышен и находится в пределах от 20% до 30%, естественное оплодотворение возможно, но не исключено, что для этого потребуется больше времени. Увеличен риск выкидыша из-за задержки или остановки развития плода.

Наступление беременности естественным путем маловероятно, если уровень фрагментации выше 30%, но ниже 50%. Рекомендовано использование технологии ЭКО.

Если результат выше 50% рекомендуется воспользоваться ИКСИ-технологией. При таких результатах ИКСИ будет эффективнее ЭКО.

Если результат выше 60% шансы на беременность даже с применением вспомогательных репродуктивных технологий крайне низкие. Лучше использовать сперму донора.

Если индекс фрагментации ДНК сперматозоидов равен 50% и более, даже при использовании репродуктивных технологий наступление беременности маловероятно.

Получили результат на руки? Покажите андрологу.

Популярные вопросы об индексе Фрагментации

Получил результат. Индекс фрагментации 21%. Что это значит?

Это случай пограничного результата. Нет повода для паники. Этот результат самый близкий к норме. Покажите заключение андрологу. Врач может назначить лечение антиоксидантами и рекомендовать оптимизировать образ жизни (режим работы и отдыха, снижение уровня стресса, прогулки на свежем воздухе и спортивная активность).

Фрагментация ДНК сперматозоида и мужское бесплодие

Одна из причин мужского бесплодия – это повреждение (фрагментация) цепочки ДНК, находящейся в ядре головки сперматозоида. Именно в молекуле этой нуклеиновой кислоты закодирована и хранится вся генетическая информация, которая при зачатии передается ребенку. И чем больше в молекуле ДНК таких разрывов, тем меньше вероятность оплодотворения яйцеклетки сперматозоидом. 

Фрагментация ДНК: что покажет спермограмма?

Спермограмма — золотой стандарт первичной оценки качества спермы. Нормы спермограммы не пересматривались с 2010 года.

С введением оценки морфологии по Крюгеру, этот анализ достиг максимальной диагностической значимости. Однако до сих пор спермограмма не может объяснить даже половины случаев мужского бесплодия.

Поэтому репродуктологам пришлось искать другие, более глубокие и конкретные методы исследования.

Диагностировать разрывы ДНК при проведении спермограммы невозможно. Сперматозоиды с поврежденной ДНК обычно сохраняют хорошую подвижность. Иногда они даже способны к оплодотворению, но наступившая беременность замирает или прерывается уже на ранних сроках.

К категории бесплодных относят не только пары с проблемами зачатия, но и с проблемами вынашивания (замершая беременность, повторяющиеся выкидыши). Вот в таких парах, при условии, что женщина здорова, мужчине ставят диагноз идиопатическое бесплодие, если не обнаруживают никаких выраженных патоспермий по результатам спермограммы. Идиопатическое — значит, что причина неизвестна.

У меня хорошая спермограмма. Не выявлено никакой патоспермии.

Зачем мне сдавать анализ на фрагментацию сперматозоида? Исследования 2016 года показали, что 10% мужчин с нормальными показателями спермограммы имели высокий индекс фрагментации ДНК сперматозоидов и входили в категорию пациентов с идиопатическим бесплодием (т.е.

бесплодие по неизвестным причинам). Поэтому есть вероятность, что у вас аналогичный случай. И тогда ваши сперматозоиды с нормальной подвижностью и морфологией будут усиливать шансы на успешную беременность.

Консультация андролога

Меньщиков Константин АнатольевичАндролог, урологКуратор лаборатории сперматологии

Консультация при повышенной фрагментации ДНК сперматозоидов с коррекцией

3000 рублей

Повторная консультация

1900 рублей

Для кого

Для тех, у кого плохие результаты спермограммы или повышен индекс фрагментации ДНК сперматозоидов. Эффективные схемы лечения даже самых сложных случаев. Медикаментозная стимуляция и коррекция сперматогенеза. Успех — 87% случаев.

Кому назначают Исследование фрагментации ДНК?

Показания для назначения тестов на ДНК-фрагментацию:

• идиопатическое (необъяснимое) мужское бесплодие 
• замершая беременность (задержка развития эмбриона) 
• многократное и безуспешное ЭКОИКСИ
• повторяющиеся выкидыши 
• варикоцеле
• возраст мужчины 45 лет и более

Кроме того, тест на фрагментацию ДНК проводится перед замораживанием донорской спермы для оценки ее качества и во время подготовки к проведению ЭКО (экстракорпорального оплодотворения) или ИКСИ (интрацитоплазматического введения сперматозоидов).

Анализ фрагментации ДНК и ВРТ (ЭКО, ИКСИ)

Анализ фрагментаций ДНК помогает определить какой именно из методов вспомогательных репродуктивных технологий (ВРТ) поможет конкретной паре. Так, парам, с низким и средним количеством повреждений ДНК у мужчины помогут внутриматочная инсеминация (IUI) и экстрокорпоральное оплодотворение.

А парам с высоким уровнем повреждения ДНК поможет ИКСИ (ICSI).

  Единственная группа пар, для которых анализ повреждений ДНК не принесет пользы это те,в которых у мужчины диагностирована и подтверждена олигоастенотератозооспермия (т.е. 3 патоспермии сразу).

Таким парам может помочь только ИКСИ и опытный андролог может сразу это сказать.

Анализ на фрагментацию ДНК необходим парам с идиопатическим мужским бесплодием. Т.е. когда диагностика устанавливает, что причина в мужчине, однако не может объяснить причину, поставить диагноз и назначить лечение.

Для пары с идиопатическим мужским бесплодием, фрагментация ДНК поможет сохранить время, не тратя его на неудачные попытки ЭКО, безрезультатные схемы лечения и общего укрепления организм.

Не тратьте время на пустое волнение, отчаяние и пустое ожидание.

Одним из наиболее изученных механизмов повреждений цепочек ДНК является действие свободных радикалов (активных форм кислорода). Они окисляют молекулу ДНК, нанося ей тем самым ущерб.

Чтобы внести ясность: свободные радикалы и повреждения ДНК есть у всех мужчин. Но в норме таких повреждений не много, а свободным радикалам должны противостоять антиоксиданты. Антиоксиданты защищают сперматозоиды, поглощая свободные радикалы. Ими богата семенная плазма — жидкость, в которой “плавают” сперматозоиды.

Чтобы выяснить как много таких потенциально опасных свободных радикалов в сперме мужчины, выполняют Исследование активных форм кислорода в нативном эякуляте (ROS) (т.е. так как он есть) или Исследование активных форм кислорода в отмытых сперматозоидах (ROS), отмывая сперматозоиды от семенной плазмы. Какой именно тест следует провести — может подсказать врач.

Чтобы выяснить насколько хорошо антиоксиданты противостоят свободным радикалам, выполняют анализ на антиокислительную активность семенной плазмы.

Что влияет на повышение фрагментаций ДНК?

Повреждения молекулы дезоксирибонуклеиновой кислоты могут произойти как во время созревания мужской половой клетки, так и в зрелом ее состоянии. На появление разрывов цепочки ДНК влияют:

1. Внешние факторы:

• радиация и токсические химические вещества;
• перенесенные инфекции, в том числе передающиеся половым путем;
• неблагоприятные климатические и экологические условия в районе проживания;
• стресс и нездоровое питание;
• курение, злоупотребление алкоголем;
• варикоцеле; 
• возраст мужчины старше 40–45 лет; 
• хронические заболевания органов мочеполового тракта; 
• химиотерапия; 
• генетическая предрасположенность. 

• неполное созревание мужских половых клеток;
• в норме мужской организм сам отбраковывает большую часть некачественных сперматозоидов, и в эякулят попадают лишь единицы из них. Если по какой-то причине в работе системы по отбраковке происходит сбой, в сперме оказывается гораздо больше «больных» половых клеток. От этого качество эякуляции не страдает, но снижается вероятность успешного оплодотворения.

Существуют данные исследований, подтверждающие, что женская яйцеклетка, оплодотворенная сперматозоидом с фрагментированной ДНК, способна «вылечить» его, восстановить поврежденную генетическую структуру. Но успех такого «лечения» определяется, в первую очередь, биологическим возрастом и состоянием здоровья женщины. Только молодые яйцеклетки, имеющие высокий потенциал к восстановлению ДНК сперматозоида, способны устранить подобный дефект. Кроме того, большое значение имеют степень разрушения и характер повреждений генетических структур.

Главное различие между этими анализами заключается в том, что HALO подсвечивает сперматозоиды с «целой» ДНК, а TUNEL — с поврежденной. Есть так же отличие в чувствительности тестов в пользу HALO и времени выполнения. На анализ фрагментации ДНК методом HALO требуется в 5-7 раз меньше времени.

Потому что сама молекула ДНК никак не влияет на основные параметры, тестируемые при анализе спермограмма: морфология, подвижность, количество сперматозоидов.

Почему анализы разные?

Как только была обнаружена значимая взаимосвязь фрагментации ДНК с проблемами на ранних сроках беременности, начался настоящий бум в разработке методик. Новые методы анализа и исследований фрагментации ДНК появляются каждый год.

Все они проходят клинические исследования, доказывают свою диагностическую значимость. В лаборатории SPERMA-TEST.ru определение Индекса Фрагментации ДНК проводится методом HALO (HALOSPERM) и TUNEL. Мы, как эксперты в области сперматологии рекомендуем использовать HALO.

Но если ваш врач назначил именно TUNEL, мы готовы провести это исследование.

Что такое TUNEL-тест?

Tunel-тест – это микроскопическое исследование спермы, цель которого – обнаружить сперматозоиды с поврежденной ДНК и посчитать их количество.

Метод позволяет оценить масштаб повреждений ДНК в сперматозоидах. Сперма смешивается со специальным реактивом. Запускается ферментативная реакция. Разрывы цепочек ДНК сперматозоидов заполняются флуоресцирующим меченым нуклеотидом. Это видно под микроскопом, когда сперматолог считает сперматозоиды с фрагментированной ДНК.

Еще 2-3 года назад TUNEL-тест использовался повсеместно. Однако это был долгий и трудоемкий в выполнении тест. Сейчас более чувствительным и информативным считается тест HALO, что подтверждается клиническими исследованиями. А срок выполнения по сравнению с TUNEL сократился в 5-7 раз.

HALO-тест — это полная альтернатива тесту TUNEL. Новый тест быстрее и эффективнее. Поэтому мы рекомендуем использовать именно его. Однако не все андрологи и репродуктологи обадают информацией о HALO и требуют от пациентов результатов TUNEL-теста. Поэтому мы оставили TUNEL в списке услуг лаборатории.

HALO или TUNEL – это исследования, которые лучше выполнять в специализированной лаборатории, где работают сперматологи и эмбриологи, а не обычные лаборанты , соблюдаются международные стандарты проведения исследований и принципы доказательной медицины. Андрологи и репродуктологи не доверяют результатам сетевых лабораторий.

Сдать сперму для проведения HALO или TUNEL можно в лаборатории сперматологии Sperma-test.ru. Стоимость HALO-теста (альтернатива TUNEL) – 6900 р. Стоимость TUNEL-теста – 7900 р.

Адрес лаборатории где можно сдать анализ:

г. Москва, 2-й Кожуховский проезд, д. 12 стр.14 МК ЭКО «Кармента»

Записаться на прием и задать вопрос можно по телефону: +7 (495) 787-79-30.

Специализированная лаборатория сперматологии Высокий профессиональный уровень, наличие собственной сертифицированной лаборатории, применение инновационных лечебно-диагностических технологий.

Услуги и цены

Запишитесь по телефону:  +7 (495) 787-79-30 Адрес:  г. Москва, 2-й Кожуховский проезд, д. 12 стр.14  МЦК остановка ЗИЛ — 2 минуты пешком

метро Автозаводская — 14 минут пешком

Часы работы лаборатории Пн — Сб 09:00-20:00 Прием образцов спермы Пн — Сб 10:00-17:00

Все доктора и сотрудники лаборатории сперматологии имеют высокую квалификацию и многолетний опыт работы.

Запись к врачу

Запись к врачу

Эмбриолог-сперматолог

Запись к врачу

Источник: https://sperma-test.ru/tunel/

Фрагментация ДНК сперматозоидов — что это за анализ? Показания, расшифровка Tunel-теста и прогнозы на беременность

Исследование фрагментации ДНК спермы – достаточно актуальная тема, если рассматривать проблему с точки зрения мужского бесплодия и бесплодных браков.

В ряде случаев классической спермограммы бывает недостаточно (даже при ее хороших показателях), возникает необходимость в дополнительном ультраструктурном исследовании. Именно таким анализом является тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов.

Делают анализ несколькими методиками, но наиболее часто используют исследование фрагментации ДНК в сперматозоидах методом Тунель (Tunel-тест).

Содержание

• Сперматогенез
• Что такое фрагментация ДНК сперматозоидов
• Причины
  • Предрасполагающие факторы
• На что влияет повреждение хроматина
• Тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов
• Высокий индекс фрагментации и привычное невынашивание
• Как снизить фрагментацию ДНК спермы
  • Хирургическое лечение варикоцеле
  • Пероральные антиоксиданты
• Кому сдавать анализ «Спермограмма с фрагментацией ДНК в сперматозоидах»
• Суть исследования
• Подготовка к сдаче анализа

Что такое физиологическая фрагментация ДНК сперматозоидов в сперматогенезе

В организме человека сперматозоид – самая маленькая клетка.

Для уменьшения его размера в процессе сперматогенеза (созревания спермия и превращения в зрелый сперматозоид) происходит специфическое преобразование. Ядро уплотняется за счет механизма конденсации хроматина.

Большая часть цитоплазмы «выбрасывается» из мужской половой клетки в виде «цитоплазматической капли», остаются только необходимые органеллы.

Схематичное изображение упаковки ДНК в хромосому

Для сборки и упаковки нитей ДНК в хромосомы необходимы белки гистоны. Из ядра будущего сперматозоида удаляются гистоны, а ДНК связывается с белками-протаминами. Это позволяет плотно конденсировать хроматин и уменьшить ядро сперматозоида.

В это время происходит «расплетание» участков ДНК и на стадии созревания они должны снова соединиться, но это происходит не всегда. У части сперматозоидов этот процесс остается незавершенным – это физиологическая фрагментация ДНК сперматозоидов.

У здоровых мужчин степень фрагментации не превышает 15%.

Патологическая фрагментация ДНК сперматозоидов – что это такое

Фрагментация ДНК сперматозоидов – это нарушение целостности ДНК мужской половой клетки, связанное с упаковкой патологического хроматина или дефицита протамина, негативно влияет на репродуктивные исходы при естественном зачатии и в программах ВРТ (ЭКО и искусственная инсеминация – ВМИ).

У бесплодных мужчин индекс сперматозоидов с нарушением целостности хромосом более 30%. При фрагментации ДНК спермы больше 30% вероятность наступления беременности крайне низкая, а ранние потери беременности высокие (замирание, самопроизвольные аборты, внематочная беременность и т. д.).

Причины фрагментации ДНК

Выделяют 2 группы причин нарушенной целостности хромосом в мужских половых клетках:

1. Внутренние дефекты сперматогенеза (аномалии развития и генетические дефекты).
2. Внешние повреждения тестикул (опосредованное влияние гонадотоксинов, гипертермии, оксидативного стресса, эндокринных заболеваний).

Непосредственно в этих случаях влияют дефицит протаминов, активные формы кислорода, нарушение механизмов апоптоза, нарушения замены гистонов на протамины в сперматидах, плохая упаковка хроматина, усиление чувствительности к оксидативному стрессу дефектных сперматозоидов.

Факторы, приводящие к фрагментации ДНК сперматозоидов

К увеличению степени фрагментации ДНК приводят:

• лейкоспермия – повышенное количество лейкоцитов (воспалительные процессы, скрытые половые инфекции);
• возраст после 35 лет;
• привычки или стиль жизни: алкоголь, табакокурение;
• внешние факторы: пестициды в продуктах питания, работа на химическом производстве, повышенная температура на рабочем месте, влияние радиации;
• неопластические патологии: лейкемия, лимфома, рак яичек и химиотерапия;
• патологические процессы: повышение температуры тела, варикоцеле, генитальные инфекции, перекрут яичка, крипторхизм, слабый сперматогенез.
• генетические факторы: нарушения ДНК-репарации, антиоксидантные гены, путь детоксикации, аберрации и микроделеции.

На что влияет повреждение хроматина в мужских половых клетках

Повышенный процент фрагментации ДНК сперматозоидов:

• снижает фертильный репродуктивный потенциал мужчины;
• снижает частоту наступления беременностей;
• увеличивает репродуктивные потери при ЭКО и естественном оплодотворении, особенно на ранних сроках;
• снижает эффективность программ ВРТ (неудачное ЭКО и ВМИ).

Кроме того, измененная ДНК приводит к хромосомным нарушениям у детей, уменьшает срок жизни потомства, способствует развитию врожденных генетических дефектов у детей.

Анализ (тест) на фрагментацию ДНК сперматозоидов: оценка результатов и расшифровка Tunel-тест

Существует несколько методик для определения индекса фрагментации ДНК:

Наиболее прогностически значимым признано исследование фрагментации ДНК в сперматозоидах методом Tunel, но экономически более выгоден Halosperm. Наиболее часто тест проводится методами Tunel, Halosperm.

Расшифровка фрагментации ДНК в спермограмме представлена в таблице 1.

Таблица 1. Индекс фрагментации

Уровень фрагментации	Расшифровка и рекомендации
0-15%	Норма. Естественная беременность представляется возможной
15-25%	Естественная беременность возможна, но ее ожидание может затянуться. Если беременность не наступает, рекомендуют проведение внутриматочной инсеминации. Если параллельно у женщины есть патологии репродуктивной сферы – следует делать ЭКО.
> 30%	Наступление беременности маловероятно, шансы увеличатся, если прибегнуть к экстракорпоральному оплодотворению.
>50%	Беременность при применении ЭКО маловероятна. Рекомендовано ЭКО ИКСИ.
>60%	Шансы очень малы, единственный выход – ИКСИ или ЭКО донорской спермой.

Фрагментация ДНК сперматозоидов и привычное невынашивание беременности

Среди гинекологов-репродуктологов актуален вопрос привычного невынашивания. Одним из факторов прерывания беременности на сроке до 12 недель в 50% случаев выявляется мужской фактор. Чаще всего это пациенты с фрагментированной ДНК. Поэтому мужчинам рекомендуют делать спермограмму с тестом фрагментации ДНК.

Как снизить процент фрагментации ДНК спермы

Стратегия повышения мужской фертильности включает:

1. устранение варикоцеле;
2. здоровый образ жизни;
3. антиоксидантную терапию;
4. применение новейших достижений ВРТ;
5. лечение, направленное на снижение количества внеклеточной ДНК.

Хирургическое лечение варикоцеле

Если варикоцеле единственная причина бесплодия, то варикоцелеэктомия (удаление варикозно расширенных вен яичка) приводит к улучшению показателей спермограммы: увеличивается концентрация сперматозоидов и подвижность.

Уменьшается фрагментация ДНК спермы, оксидативный стресс, улучшается морфология половых клеток. Повышается частота наступления спонтанной беременности и уменьшается количество случаев невынашивания в 1 триместре.

У прооперированных мужчин с нормозооспермией (нормальными показателями спермограммы) и проведенной варикоцелеэктомией достоверно снижена частота повторного невынашивания беременности.

Нормализация образа жизни

Ожирение, алкоголь, курение, перегревание, радиация (Wi-Fi, мобильные телефоны, пестициды) – способствующие факторы. Необходимо лечение или сведение к минимуму их влияния. Что касается курения, перегревания, алкоголя – их нужно полностью исключить, чтобы уменьшить повреждение ДНК. Важно избавиться от избыточного веса (если он есть).

Препараты, которые используются для лечения сопутствующих заболеваний, также провоцируют повышение фрагментации.

Поэтому пару, вступающую в протокол ЭКО, тщательно расспрашивают о применяемых препаратах и по возможности переводят на альтернативные лекарственные средства.

Лечение пероральными антиоксидантами

Для лечения повышенной фрагментации ДНК сперматозоидов используются препараты супероксиддисмутазы, каталазы, глутатионпероксидазы, витамины E, C, каратиноиды, убихинон, селен, цинк, L-карнитин, фолиева кислота, N-ацетилцистеин, коэнзим Q 10.

Употребление в пищу антиоксидантов повышает шансы не только на спонтанное зачатие, но и положительные исходы протоколов ВРТ.

Но единственным научно обоснованным препаратом, понижающим фрагментацию ДНК сперматозоидов, является докозагексаеновая кислота (ДКГ).

Это незаменимая полиненасыщенная жирная кислота класса Омега-3, является одним из важных компонентов яичек, спермы, серого вещества мозга, сетчатки, клеточных мембран.

Она обладает мощной антиоксидантной активностью и принимает участие в упаковке генетического материала. Эта кислота содержится в жире морских рыб (треска, лосось, сельдь, кит).

Эмпирическая антиоксидантная терапия подбирается индивидуально и назначается длительным курсом – 12 недель.

Кому нужно сдать тест на фрагментацию ДНК

Анализ на фрагментацию ДНК спермы не входит в стандарты обследования, как спермограмма или МАР-тест.

Tunel-тест может быть рекомендован при:

• идиопатическом бесплодии (когда причина неизвестна);
• после множественных неудачных попыток ЭКО;
• получении в протоколе ЭКО эмбрионов невысокого качества;
• привычном невынашивании и неоднократных выкидышах;
• варикоцеле;
• мужчинам после 45 лет;
• после размораживания криоконсервированной спермы (для крио ЭКО: необходимо убедиться, что процент клеток с поврежденной ДНК не превышает нормы);
• высокой температуре, наблюдаемой в последние 3 месяца.

Патофизиологические процессы, приводящие к повреждению ДНК, не до конца изучены. Определенная схема лечения бесплодия, вызванная этим фактором, пока не разработана. А методы репродуктивной медицины не всегда позволяют достичь положительного результата. Но нормализация структуры ДНК сперматозоидов позволяет улучшить качество эмбрионов и увеличить частоту клинических беременностей.

Суть метода Tunel

Для проведения теста сперму сдают как обычную спермограмму. Из образца биоматериала часть используется для светооптического исследования, где оцениваются морфологические качества сперматозоидов и состав спермы. Часть исследуется по методу Tunel.

В пробу для оценки фрагментации добавляют раствор меченных флюоресцирующих нуклеотидов, которые способны связываться с обрывками нитей ДНК. Нуклеотиды встраиваются в разорванную цепочку и выступают в качестве меток, которые флуоресцируют под микроскопом. Затем высчитывается процентное содержание «меченых» сперматозоидов и выдается результат.

Как подготовиться к исследованию

Перед сбором биоматериала действуют те же требования, как и перед сдачей спермограммы:

• Половое воздержание не менее 2 и не более 7 дней. Лучшее время – 3 суток. Если сдается анализ повторно, то лучше чтобы промежутки воздержания были одинаковыми.
• Отказ от алкоголя, курения, перегревания (сауны, бани и т.д.) сроком 3 месяца (весь процесс сперматогенеза длится в среднем 72 дня).
• Прекращение приема любых лекарственных препаратов, если врачом не указано обратное и нет угрозы жизни из-за прерывания терапии.
• Если мужчина перенес ОРВИ, грипп и другие заболевания с повышением температуры тела – сдачу анализа необходимо перенести.
• Накануне исключить физические и эмоциональные нагрузки.

Весь период подготовки необходимо правильное питание и соблюдение питьевого режима (1,5-2 литра в день).

Необходимо понимать, что качественные характеристики мужских половых клеток меняются во времени, в отличие от женских. Поэтому, точность результатов зависит от того, насколько вы серьезно подойдете к вопросу подготовки и лечению (для повторного теста на фрагментацию).

Актуальное видео

Фрагментация ДНК сперматозоидов

Рекомендуемые материалы:

• МАР-тест для мужчин — что это такое
• Оплодотворение яйцеклетки — как происходит процесс по времени
• ЭКО ИМСИ — что это такое: показания, суть и преимущества
• Анализ на скрытые инфекции
• Тест на антиспермальные антитела
• Азооспермия: причины,лечение, прогноз на зачатие
• Что значит мужской фактор бесплодия
• Диагностика бесплодия у мужчин и женщин: необходимые анализы и обследования

Источник: https://stanumamoy.com.ua/fragmentatsiya-dnk-spermatozoidov/

Фрагментация ДНК сперматозоидов (TUNEL-тест)

Если повреждения несущественны, яйцеклетка в состоянии устранить их самостоятельно. Это зависит от характера фрагментации, количества поврежденных участков, качества самой яйцеклетки (обычно ее определяет возраст и состояние репродуктивного здоровья женщины).

Причины

Причины нарушения ДНК бывают двух типов: внешние и внутренние. Внутренние это:

• Сбой механизма отбраковки. У здоровых мужчин непригодные к оплодотворению сперматозоиды, вырабатываемые семенниками (тестикулами), устраняются. Но если функционирование механизма нарушено, они попадают в сперму, снижая ее качество и способность к зачатию.
• Нарушение процесса вызревания. Созревают сперматозоиды в придатках яичек, в ходе вызревания происходит конденсация хроматина ядра клеток, отвечающая за активность сперматозоидов. Если процесс протекает с отклонениями, это становится причиной фрагментации их ДНК.

Внешние:

• Прохождение лечения химио- и рентгенотерапией.
• Повышенная температура тела.
• Варикоз сосудов семенного канатика.
• Высокотемпературные воздействия.
• Наличие хронических заболеваний, воспалений, инфекций.
• Оксидативный стресс при переходе через эпидидимий. Повреждения вызывают свободные радикалы, либо сперматозоиды выходят невызревшими.

Также нарушение цепочки ДНК вызывают токсины, прием антибиотиков, заболевания мочеполовой системы, вредные привычки.

Показания к анализу

Чтобы выявить разрыв ДНК-цепочки сперматозоидов, проводится специальный тест. Спермограмма в данном случае неинформативна. Она показывает только концентрацию сперматозоидов в эякуляте, их активность. Тест на фрагментацию показан:

• при мужском бесплодии, если отсутствуют другие провоцирующие его факторы;
• если попытки искусственного оплодотворения не дали результата;
• повторяющиеся выкидыши;
• если эмбрион плохого качества;
• мужчинам в возрасте от 45 лет;
• после криохранения образца спермы перед ЭКО (экстракорпоральным оплодотворением);
• при варикозе сосудов семенного канатика;
• если в течение трех месяцев имела место повышенная температура тела.

Также процедуру должны пройти мужчины, работающие в условиях повышенной вредности.

Как проводится анализ

Чтобы получить точный результат, анализ должен быть проведен в течение часа с момента забора образца. Для этого лаборант добавляет в эякулят реактив. Он, вступая в реакцию с семенной жидкостью, заполняет разрывы ДНК флуоресцирующим нуклеотидом, делая видимыми фрагментированные сперматозоиды. Лаборант проводит их подсчет, который указывается в процентах.

Для получения полной картины параллельно проводится электронно-микроскопическое исследование и спермограмма.

Подготовка к TUNEL-тесту

Чтобы тест был максимально точным, перед сдачей образца необходимо в течение 2-7 дней: воздержаться от половых контактов, приема лекарственных препаратов, посещения бань. Важно соблюдать режим питания, избегать употребления алкоголя, не курить. Перед забором спермы нужно освободить мочевик.

При повторных проведениях анализа рекомендуется соблюдать последовательность и длительность подготовительных мероприятий, так как это может повлиять на результат.

Расшифровка

После анализа выдается результат с индексом теста и снимок, на котором зафиксированы фрагментированные сперматозоиды. Индекс – это соотношение между поврежденным и здоровым, способным к оплодотворению, генетическим материалом.

В норме показатель не должен быть выше 15%. Это говорит о том, что спермиев с разрушенной цепочкой ДНК меньше, чем здоровых, поэтому репродуктивное здоровье мужчины в порядке и существует высокая вероятность естественного зачатия.

При индексе выше 15%, но ниже 30% сохраняется возможность оплодотворения яйцеклетки естественным способом, но для этого может потребоваться много времени.

Так, при показателе индекса более 30%, врачи-репродуктологи рекомендуют проводить ЭКО. Если фрагментированный генетический материал составляет 50% и выше, экстракорпоральное оплодотворение малоэффективно. Целесообразно применять интрацитоплазматическую инъекцию сперматозоидов (ИКСИ). При индексе 60% и больше, шансы на успешное оплодотворение минимальны.

Проводится ИКСИ, либо берется донорская сперма.

Лечение

Еще недавно отсутствовала возможность выявить поврежденные сперматозоиды, не говоря о том, чтобы это лечить. Сегодня эта проблема поддается лечению. Внедрение инновационных медицинских методик позволяет успешно восстанавливать фрагментированную ДНК сперматозоидов.

Для этого следует устранить или ограничить воздействие факторов, провоцирующих мужское бесплодие: лишний вес, вредные привычки (курение, алкоголь), воздействие токсических, химических веществ (работа на вредных производствах).

Второй этап – комплексная диагностика, устранение различных воспалительных процессов в организме, в том числе заболеваний репродуктивной системы мужчины. Параллельно проводится лечение антибактериальными, противовоспалительными медпрепаратами (при необходимости).

Обязательно назначаются витаминные комплексы, антиоксиданты, позволяющие восстановить мужское здоровье и способствующие формированию здоровых сперматозоидов.

Длительность лечения может составлять 3-6 месяцев. Иногда может понадобиться больше. Если терапия оказалась малоэффективной, и количество здоровых сперматозоидов не превышает 20-30%, врачи предлагают паре услугу ИКСИ. Так, из эякулята репродуктологи искусственным путем отбирают здоровый, способный к оплодотворению, генетический материал. Затем его подсаживают в яйцеклетку женщины.

В случае большого количества спермиев с фрагментированным ДНК, также проводиться операция по извлечению их непосредственно из яичек. Это обусловлено тем фактом, что во время эякуляции повышается процент поврежденных клеток.

Как улучшить фрагментацию ДНК? Сначала необходимо разобраться в возможных причинах фрагментации и затем убрать ее причину, если это возможно.

• Олигозооспермия: причины и лечение
• Гемоспермия

Источник: https://krmed.ru/articles/fragmentacia_dnk_spermatozoidov.html

Фрагментация ДНК сперматозоидов правильное лечение фото и видео

Если раньше у пары могла возникнуть проблема бесплодия, и решить её было достаточно проблематично, потому что не было возможности выявить причину невозможности зачатия, то в современной медицине существуют устройства, знание, методы, технологии способные избавить от бесплодия как мужчин, так и женщин.

Одной из таких причин невозможности зачатия является фрагментация сперматозоидов. Следует подробно рассмотреть, что это за явление, и каким образом оно может быть устранено.

Понятие фрагментации спермы

Процесс фрагментации спермы – это повреждение и разрыв цепочки ДНК в основании спермия. Основными причинами разрушения цепочки ДНК является недостаток белковых образований в клетках сперматозоидов, что впоследствии разрушает строение цепочки.

Чем меньше становится транспортного белка, тем больше вероятность получения повреждения в структуре ДНК. Впоследствии спермии теряют свою способность к зачатию новой жизни. Неповрежденное состояние цепочки ДНК – это основание, по которому генетические коды передаются будущему ребенку.

 Следует заметить, что мужчины с диагнозом бесплодие имеют около 30% поврежденных спермиев. Среди здоровых мужчин около 10% имеют диагноз фрагментация ДНК спермограммы.

Почему нарушается целостность ДНК?

Причины, по которым генетическая структура сперматозоидов будет разрушаться, можно разделить на внутренние и внешние. К внутренним можно отнести причины, не видные невооруженным глазом, и на которые повлиять достаточно сложно, а именно:

• нарушение выбора мужских клеток;
• недостаточное взросление спермиев.

Сперматозоиды созревают и развиваются в мужских семенниках, яичках. В процессе взросления спермии могут иметь различные отклонения в генетической структуре и развитии. Это считается нормальным. Однако такие повреждённые экземпляры не поступают в семенной канал и извергаются по причине наличия в организме мужчины защитной функции, не пропускающей болезненные частицы.

Проходя через защитную функцию фрагментированные спермии уничтожаются. Но если процесс обороны нарушен или перестал действовать по причине ослабления иммунитета, то в таком случае больные экземпляры начинают поступать в семенной канал и в яйцеклетку. Это никаким образом не способствует здоровому оплодотворению.

Во втором случае сперматозоид не прошел всю стадию своего роста. Каждая мужская клетка должна дозреть до того момента, как поступить на оплодотворение в женскую яйцеклетку.

К внешним причинам, по которым происходит фрагментация цепочки ДНК относятся основания безответственного отношения человека к собственному здоровью.

У многих мужчин сегодня обнаруживается склонность к различным нарушениям в структуре клеток. Впоследствии эти нарушения могут вызывать бесплодие и диагноз фрагментация ДНК сперматозоидов.

Почему может нарушаться целостность цепочки ДНК? Вот некоторые часто встречающиеся основания для этого:

1. Проблемы могут появляться при несоблюдении мужчиной здорового образа жизни, если человек подвержен стрессу, чрезмерному употреблению алкогольных напитков, курению, злоупотреблению жирной пищей.
2. В случае работы в тяжелых условиях производства, а именно: окружение токсическими веществами, наличие постоянных аллергенов и других, оказывающих негативное влияние на мужской организм.
3. Долгое воздержание человека от половых контактов.
4. Воспалительный и инфекционный процессы в половых органах и элементах мочеиспускательной системы.
5. Предрасположенности с рождения к болезням органов половой системы, а также различные генетические аномалии и болезни.

И как можно понять из данного списка, некоторые причины возникновения бесплодия могут быть устранены, и состояние сперматозоидов может быть скорректировано. Но в некоторых случаях это сделать достаточно проблематично, и врачи в таком случае ищут другие методы и воздействия для устранения нарушений цепочки ДНК.

Как пройти проверку ДНК?

Процедуру проверки на состояние неповрежденности цепочки ДНК может назначить только лечащий врач. Такой действие не является обязательным при проведении исследования перед планированием зачатия ребенка. Только при определенных основаниях лечащий врач может направить пациента для прохождения проверки ДНК.

Анализ фрагментации ДНК сперматозоидов проводится по следующим основаниям:

• • не выявлено факторов, влияющих на бесплодие у пациента;
  • имеются основания для проведения технологии искусственного оплодотворения;
  • в случае выкидышей у полового партнера мужчины на ранних стадиях;

• для проверки качества спермы для консервации и донорства;

Обычно для проверки сперматозоидов мужчины используют метод спермограммы. Однако целостность цепочки ДНК может проверить только специальная процедура, называемая методом опосредованной метки разрыва цепочки ДНК.

Работает тест на фрагментацию ДНК сперматозоидов следующим образом:

• в сперму добавляют химические вещества, вызывающие реакцию, которую рассматривают под увеличением в микроскопе;
• происходит просчет процентного соотношения качественных и поврежденных генетических цепочек.

До того, как пройти проверку на наличие фрагментации сперматозоида, мужчине следует пройти определенную подготовку.

• Во-первых, врач рекомендует мужчине не вступать в сексуальные контакты от двух до четырех дней.
• Во-вторых, мужчине следует воздерживаться от приема алкогольных напитков и никотина в течение семи дней перед процедурой.

• В-третьих, проконсультироваться о приеме лекарственных препаратов и витаминных комплексов до проведения процедуры проверки ДНК.
• В-четвертых, мужчине следует отказаться от теплового воздействия на организм:, подогрева сидений, посещения бань, саун и другого теплового воздействия.

Эякулят для проведения анализа собирается в лабораторных условиях путем самоудовлетворения. После чего через несколько дней мужчине выдается результат проведенного анализа. В процентном соотношении нормальное количество поврежденных ДНК должно составлять не более 15% от общего числа сперматозоидов.

Проводить тесты на количество здоровых и поврежденных сперматозоидов следует два, а то и три раза, так как данное тестирование не является точным. К тому же есть вероятность самовосстановления количества разрушенных клеток, что приведет к восстановлению репродуктивной функции мужчины.

Каким образом можно восстановить структуру спермы?

Структура цепочки ДНК сперматозоида имеет способность к восстановлению. В таком случае у мужчины появляется возможность зачать здорового младенца. Однако восстановительному процессу будут мешать также и молодость женской яйцеклетки, и факторы, относящиеся к здоровью мужчины.

ВАЖНО! Исходя из способностей клеток постоянно изменяться, могут отличаться и анализы спермы разных периодов давности.

Мужчина соблюдением здорового образа жизни и путём следования рекомендациям лечащего врача может изменить и улучшить структуру цепочки ДНК. Таким образом, фрагментированный сперматозоид может восстановить свою репродуктивную функцию.

При попадании сперматозоида с нарушенным ДНК яйцеклетка восстанавливает эякулят, что приводит к нормальному и здоровому зачатию. Очень важным в таком взаимном восстановлении является возраст женщины: чем моложе яйцеклетка, тем больше у нее возможностей для реанимирования мужского сперматозоида.

К рекомендациям врача может относиться восстановительную терапию с применением препаратов антиоксидантов и витаминных комплексов. Данные вещества оказывают восстанавливающее воздействие на генетическую цепочку спермы.

Но в случае, если на мужчину длительное время оказывалось сильное влияние химических веществ, из-за чего и произошло видоизменение генетического материла, то в таком случае витаминные комплексы будут малоэффективны. В таком случае врачами назначается более комплексное и сильнодействующее лечение.

Лечение фрагментации ДНК современными технологиями

Медицина, отвечающая за восстановление репродуктивной функции человека, сделала возможным восстановление цепочки ДНК сперматозоидов.

Когда происходит процесс лечения, в первую очередь нужно устранить следующих негативные факторы, влияющие на бесплодие:

• никотин;
• алкоголь;
• химическое и токсическое влияние на организм;
• избыточный вес.

Параллельно с этим врачи проводят полную диагностику организма мужчины и устраняют сопутствующие болезни, имеющиеся патологии половых органов, варикоцеле, инфекции мочеполовой системы. Лечение витаминами и антиоксидантами является дополнительной активацией жизненной силы в организме.

В репродуктивных медицинских центрах для семейных пар предлагается услуга, которая поможет зачать здорового младенца. Называется она ИКСИ. Заключается этот процесс в том, что искусственно у мужчины выбирается жизнеспособный сперматозоид, который вводится в яйцеклетку партнёрши. Такая процедура отличается от популярного ЭКО тем, что врачи отбирают лучшие сперматозоиды, а не случайные.

Проверка проводится путем погружения выбранных сперматозоидов в гиалуроновую кислоту. Если мужская половая клетка в порядке, то она спокойно связывается с кислотой, после чего сперматозоид можно погружать в яйцеклетку. Зачатие происходит только от клетки без генетических повреждений.

Если у мужчины имеется слишком много сперматозоидов с нарушенным ДНК, то в таком случае, врачи могут провести хирургическую операцию по выделению клеток прямо из яичек. Это связано с тем, что при семяизвержении поврежденных мужских клеток становится больше.

Из вышеописанного следует, что излечение от мужского бесплодия в некоторых случаях возможно. Если восстановительный процесс клеток сперматозоидов требует отказа от вредных привычек, то в таком случае у семейной пары высока вероятность зачать здорового и крепкого младенца.

Современная медицина и при такой диагнозе может помочь зачать ребенка нуждающейся паре.

Источник: https://AnnaHelp.ru/zabolevaniya/fragmentaciya-dnk-spermatozoidov.html